流行性腮腺炎病毒荧光定量逆转录-聚合酶链反应快速检测方法的建立

• 作者: 严菊英 冯燕 卢亦愚 史雯 周敏
• 来源期刊: 中国计划免疫
• 学科: 医学
• 关键词: 流行性腮腺炎病毒 荧光定量逆转录-聚合酶链反应 TaqMan-MGB探针
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 394-398
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-916X.2006.05.018

摘要

目的 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),用于检测流行性腮腺炎(腮腺炎)病毒(MuV)核酸.方法 针对MuV血凝素(H)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、灵敏度与准确性;并通过体外克隆技术建立MuV基因拷贝数定量分析模型.结果 引物与探针的优化浓度分别为880mmol/L和280mmol/L,具有良好的保守性和特异性,与其它呼吸道病毒均无交叉反应;方法检测灵敏度为10拷贝/反应,相当于0.01TCID50,标准曲线线性范围为107～10拷贝/反应;从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好.结论 TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法特异、敏感、快速,为MuV的早期快速检测提供了一种新的检测技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢亦愚		127	1020	16.0	23.0
2	严菊英		97	823	16.0	22.0
3	冯燕		45	420	12.0	18.0
4	史雯		34	360	12.0	17.0
5	周敏		31	323	11.0	16.0