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摘要:
目的:制备具有功能活性的重组小鼠高迁移率族蛋白B1(recombinant mouse high-mobility group box-1,rmHMGB1)并观察其抗菌活性,为深入研究HMGB1抗菌功能创造条件.方法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,经RT-PCR扩增得到编码小鼠HMGB1的cDNA片段,序列测定正确后,构建于原核表达载体pQE-80L,转化于大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达目的蛋白,再经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后,通过试管稀释法、琼脂扩散法两种抗菌实验观察并比较rmHMGB1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(JM109、ATCC25922、DH5α)、绿脓杆菌抗菌活性的差异.结果RT-PCR扩增得到了约648bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码小鼠HMGB1的cDNA序列一致,纯化后的rmHMGB1对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(JM109、ATCC25922、DH5α)有明确的抗菌活性,其抗菌活性强弱依次为金黄色葡萄球菌>JM109>ATCC25922>DH5α,对绿脓杆菌则无抗菌活性.结论利用大肠杆菌可表达重组小鼠HMGB1,所获得纯化产物对部分细菌确有抗菌活性,此研究为进一步探讨HMGB1抗菌功能的机制奠定了基础.
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文献信息
篇名 重组小鼠高迁移率族蛋白B1抗菌活性研究
来源期刊 第三军医大学学报 学科 医学
关键词 高迁移率族蛋白B1(HMGB1) 原核表达 抗菌活性
年,卷(期) 2006,(9) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 939-941
页数 3页 分类号 Q74|Q51|R978.16
字数 2847字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.09.022
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 何凤田 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 127 592 12.0 15.0
2 李蓉芬 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 38 166 7.0 11.0
3 胡颖 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 4 13 2.0 3.0
4 高会广 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 15 84 4.0 9.0
5 龚薇 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 19 67 5.0 7.0
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高迁移率族蛋白B1(HMGB1)
原核表达
抗菌活性
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第三军医大学学报
半月刊
1000-5404
50-1126/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
78-91
1979
chi
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97850
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