体外内层血视网膜屏障模型中Müller胶质细胞对紧密连接的影响

• 作者: 惠延年 王应利 郭斌
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜 胶质细胞 微血管内皮细胞
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 311-316
• 页数: 6页
• 分类号: R77
• 字数: 5392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2006.02.014

摘要

目的:建立体外内层血视网膜屏障(iBRB)模型并研究视网膜Müler胶质细胞(RMGC)对紧密连接(TJ)的影响.方法:采用免疫磁珠方法原代纯化和培养大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMEC),采用改良酶消化方法培养RMGC,RMEC和RMGC在微孔膜的两侧共培养建立iBRB模型,通过相差显微镜和透射电子显微镜(TEM)观察两种细胞的生长和TJ的形态.采用跨内皮细胞电阻(TER)测量和TJ相关蛋白ZO-1荧光染色和蛋白电泳来评价TJ的变化情况.结果:RMEC和RMGC均可在膜上正常生长,RMGC间紧密连接.TEM观察高TER值样品中相邻RMEC形成典型的TJ结构.RMEC层TER在8d时达到最高,为(86.3±7.9)Ω·cm2,此后保持相对稳定.在RMGC存在的共培养组TER 7d时为(97.6±3.6) Ω·cm2,约为7d时RMEC组的2倍,8d达到峰值(113.5±5.3)Ω·cm2.在iBRB模型发展过程中,ZO-1的表达强度随时间延长而增加.结论:通过RMEC和RMGC的共培养可以建立体外iBRB模型,RMGC加快RMEC间的TJ成熟.