表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定

• 作者: 刘正飞 曹胜波 琚春梅 郗鑫 陈焕春
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪2型圆环病毒 ORF2基因 伪狂犬病毒 TK-/gG-/ORF2+ 鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1716-1722
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 字数: 5587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2006.08.028

摘要

[目的]以伪狂犬病病毒为载体,构建表达猪2型圆环病毒ORF2基因的重组病毒,并研究其生物学特性.[方法]将猪2型圆环病毒ORF2基因插入到伪狂犬病病毒gG缺失通用转移载体中,构建猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒重组中间转移质粒,然后将该质粒与伪狂犬病病毒TK-/gG-/LacZ+基因组共转染IBRS-2细胞,待发生细胞病变后收集病毒液进行重组病毒的筛选及生物学特性测定.[结果]利用检测PCV2 ORF2基因和LacZ基因的PCR方法筛选到重组病毒TK-/gG-/ORF2+,同时用Southern blotting证实外源基因PCV2 ORF2已成功插入到TK-/gG-/LacZ+亲本株的基因组中.间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting结果显示重组病毒中PCV2 ORF2基因获得了成功表达.对重组病毒的生物学特性研究表明,重组病毒与其亲本株在不同细胞上的增殖滴度相当,且重组病毒对小鼠无致病性,免疫小鼠后可诱导机体产生抗ORF2蛋白的特异性抗体.[结论]重组伪狂犬病毒构建成功,且表达的ORF2蛋白具有免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学动物医学院	331	4866	36.0	53.0
2	曹胜波	华中农业大学动物医学院	36	641	13.0	25.0
3	郗鑫	华中农业大学动物医学院	3	48	3.0	3.0
4	刘正飞	华中农业大学动物医学院	40	892	15.0	29.0
5	琚春梅	华中农业大学动物医学院	12	252	9.0	12.0