靶向leptin基因的siRNA对大鼠肝星状细胞生物学特性的影响

• 作者: 周鹤俊 宋宇虎 林菊生 蔡晓坤 薛秀兰
• 来源期刊: 华中科技大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 瘦素 肝星状细胞 小干扰RNA
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 331-335
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2006.03.015

摘要

目的构建具有特异性瘦素(leptin)基因小于扰RNA(small interfering RNA,siRNA)功能的表达质粒,研行究靶向leptin基因的siRNA对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中leptin表达及HSC生物学特性的影响.方法以leptin为目的基因,以产生siRNA质粒载体psiRNA-hH1neo为表达模板,细胞内转录合成4对特异的siRNA和1对对照siRNA.构建能在真核细胞中表达的重组质粒leptin siRNA,用酶切方法和测序法对重组体进行鉴定.应用脂质体介导重组质粒转染HSC.RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学法检测HSC的leptin表达情况,用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞仪分析细胞凋亡.结果酶切和序列测定表明,成功构建了leptin siRNA表达质粒;外源重组质粒siRNA3和siRNA4能够抑制leptin mRNA和蛋白表达(均P＜0.01);HSC增殖活性显著降低(P＜0.05),凋亡增加(P＜0.01).与未转染组相比,consiRNA、siRNA1和siRNA2转染组没有显著改变(均P＞0.05).结论构建的leptin siRNA表达载体可减少leptin的表达,抑制HSC增殖并诱导其凋亡.为肝纤维化基因治疗提供了新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林菊生	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	113	535	12.0	17.0
2	蔡晓坤	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	13	73	4.0	8.0
3	宋宇虎	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	31	102	6.0	8.0
4	周鹤俊	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	9	51	4.0	7.0
5	薛秀兰	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	5	19	3.0	4.0