RNAi抑制肝星状细胞TIMP-1基因表达及对细胞生物学行为的影响

• 作者: 于晓光 刘秀萍 刘鑫 徐华锋 林平 邹海峰
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 肝星状细胞 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 342-347
• 页数: 6页
• 分类号: R34
• 字数: 4274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2007.04.012

摘要

研究了siRNA对大鼠肝星状细胞(CFSC)TIMP-1基因表达及对细胞生物学行为的影响.用RT-PCR方法获得带有T7启动子的TIMP-1全基因序列,体外转录法获得TIMP-1dsRNA,Dicer酶切后得到siRNA,用质脂体将siRNA转染至CFSC,RT-PCR检测TIMP-1 mRNA的表达,MTT方法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果成功获得TIMP-1 siRNA,将TIMP-1 siRNA转染至CFSC 12、24、48 h后,与对照相比,TIMP-1 mRNA的表达逐渐下降,经Quanity One(BIO-RAD,USA)分析后,其抑制率分别为49.18%、58.72%和64.73%;siRNA转染CFSC细胞后,CFSC生长受到抑制,细胞凋亡不明显.实验结果表明体外转录法得到的siRNA能有效地降低大鼠CFSC中TIMP-1的表达,明显抑制CFSC的增殖,但不直接引起CFSC的凋亡.