重组α-胞衬蛋白的表达及其在原发性干燥综合征临床研究中的意义

• 作者: 何菁 张翠华 李晶 栗占国 陈巧林
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α-胞衬蛋白 干燥综合征 抗α-胞衬蛋白抗体
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 1146-1149
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3773字
• 语种: 中文

摘要

目的:利用pGEX-4T-2表达载体在大肠杆菌BL21中表达重组的GST-α-胞衬蛋白(α-Fodrin),以纯化获得的GST-α-胞衬蛋白为抗原,利用免疫印迹法对其抗体在原发性干燥综合征(pSS)中的诊断意义进行研究.方法:将表达质粒pGEX-4T-2-α-Fodrin转入大肠杆菌BL21,IPTG诱导培养,收集的细菌经超声破碎后离心,利用Glutathione-Sepharose 4B亲和层析及Sephacryl-S 100分子筛获取纯化的α-胞衬蛋白,通过SDS-PAGE电泳及免疫印迹法进行鉴定.最终以纯化得到的GST-α-胞衬蛋白为抗原,运用免疫印迹法测定干燥综合征患者及其他疾病患者血清中的抗α-胞衬蛋白抗体.结果:SDS-PAGE凝胶电泳显示表达产物分子量为97 kD,与GST-α-胞衬蛋白分子量一致.用原发性干燥综合征病人血清对纯化出的GST-α-胞衬蛋白和GST分别进行免疫印迹分析,结果表明血清中的抗α-胞衬蛋白抗体是针对α-胞衬蛋白抗原的特异性抗体.原发性干燥综合征(pSS)患者血清中抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率为63.75%(51/80),明显高于正常人的21.67%(8/37)(P<0.01),且各例正常人的阳性条带均明显浅于原发性干燥综合征患者.其他疾病包括类风湿关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)及骨性关节炎(OA)患者血清抗α-胞衬蛋白抗体的阳性率分别为33.33%(13/39)、25.71%(9/35)及33.33%(4/12).结论:通过GST融合蛋白表达系统获得了具有抗原性的α-胞衬蛋白,抗α-胞衬蛋白抗体测定可能对原发性干燥综合征的诊断有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	栗占国	北京大学人民医院风湿免疫科	286	2897	24.0	41.0
2	何菁	北京大学人民医院风湿免疫科	61	395	12.0	17.0
3	陈巧林	中国科学院广州生物医药与健康研究院分子诊断研究室	6	12	2.0	3.0
4	李晶	北京大学人民医院风湿免疫科	74	758	14.0	26.0
5	张翠华	北京大学人民医院风湿免疫科	5	26	2.0	5.0