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激肽释放酶腺相关病毒载体的构建及对脐静脉内皮细胞功能的影响
激肽释放酶腺相关病毒载体的构建及对脐静脉内皮细胞功能的影响
作者:
俞兆希
朱鹏立
李体远
阮景明
陈慧
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
激肽释放酶类
依赖病毒
内皮,血管
摘要:
目的 构建激肽释放酶(HK)腺相关病毒(AAV)载体,检测重组病毒感染脐静脉内皮细胞系(HUVEC)后HK基因和内皮功能相关基因表达的变化.方法 HK基因克隆人腺相关病毒载体质粒pAAV-MCS,和腺相关病毒包装质粒pAAV-RC、腺病毒辅助质粒pHelper共转染293细胞,包装成带有HK基因的重组腺相关病毒(rAAV-HK).以rAAV-HK感染HUVEC.RT-PCR法检测HK基因、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、凋亡蛋白酶(caspase-3)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素B1受体以及缓激肽B1受体、缓激肽B2受体的mRNA转录变化.ELISA法测定HUVEC上清液和胞内HK的含量.结果 成功构建了rAAV-HK.rAAV-HK感染HUVEC后,实验组胞内HKmRNA转录(0.59±0.12)比空白组(0.26±0.05)明显增加(P<0.01);实验组胞内HK含量(120.1±40.9)比空白组(30.8±12.8)显著升高(P<0.01);实验组eNOSmRNA转录(1.19±0.28)较空白组(0.66±0.11)增加(P<0.05),实验组caspase-3mRNA转录(0.30±0.25)较空白组(0.67±0.27)减弱(P<0.05).VEGF、内皮素-1、内皮素B1受体、缓激肽B1受体、缓激肽B2受体mRNA转录两组差异无统计学意义.结论 rAAV-HK病毒感染HUVEC后能高效表达HK,并促进HUVEC胞内eNOSmRNA转录,抑制caspase-3mRNA转录.提示导入HK基因能够改善内皮功能.
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文献信息
篇名
激肽释放酶腺相关病毒载体的构建及对脐静脉内皮细胞功能的影响
来源期刊
中华老年医学杂志
学科
医学
关键词
激肽释放酶类
依赖病毒
内皮,血管
年,卷(期)
2006,(12)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
925-929
页数
5页
分类号
R3
字数
3721字
语种
中文
DOI
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单位
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依赖病毒
内皮,血管
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研究来源
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研究去脉
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期刊影响力
中华老年医学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0254-9026
CN:
11-2225/R
开本:
大16开
出版地:
北京市东城区大佛寺东街6号院内124或108室
邮发代号:
2-57
创刊时间:
1982
语种:
chi
出版文献量(篇)
7422
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11
总被引数(次)
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