保罗样激酶1表达抑制导致胃癌MKN45细胞有丝分裂停滞

• 作者: 兰斌 刘炳亚 张晓青 戴起宝 朱正纲 瞿颖 蔡劬 陈雪华
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 保罗样激酶1 RNA干扰 细胞周期
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 164-168
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4352字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0253-3766.2006.03.002

摘要

目的探讨保罗样激酶1(PLK1)基因在胃癌MKN45细胞有丝分裂中的作用.方法应用RNA干扰(RNAi)技术阻断MKN45细胞PLK1基因的表达;real-time定量PCR和Western blot检测干扰前后PLK1 mRNA及蛋白质表达的变化;免疫荧光及激光共聚焦显微镜观察MKN45细胞微管及有丝分裂表型的改变;倒置显微镜观察MKN45细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果经靶向PLK1的小型干拢RNA(siRNA)作用后,MKN45细胞的PLK1 mRNA及蛋白质表达明显下降;细胞微管结构变得模糊,失去完整性;PLK1-细胞有丝分裂表型发生明显变化,有丝分裂开始时,较高比例(46.3%)的细胞处于Ⅰ亚期,较低比例的细胞处于Ⅱ亚期(1.2%)及Ⅲ亚期(1.7%),有较高比例的带哑铃状细胞核的MKN45细胞(32.8%)及细胞间连接有胞质桥的MKN45细胞(8.4%),与对照siRNA组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);较多MKN45细胞呈圆形改变,并呈现G2期细胞的DNA含量,siRNA作用24、48及72 h后,PLK1-组G2期DNA含量细胞分别为43.7%、41.0%和58.5%,与对照siRNA组在3个时间点差异均有统计学意义(P＜0.05).结论PLK1基因在MKN45细胞有丝分裂过程中起着关键作用,抑制其表达可导致MKN45细胞有丝分裂停滞.