MAPK信号转导通路多基因多重RT-PCR方法的建立

• 作者: 曹骥 焦杨 苏建家 陈茂伟
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 多重逆转录PCR 分裂原激活的激酶信号转导通路 基因 信使RNA
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 274-276
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2301字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2006.02.040

摘要

目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法.方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基因序列用Align X进行同源性比较,选取保守区应用primer 5软件设计3对引物,建立Multi RT-PCR检测体系,分别扩增ERK1、JNK1、p38基因,产物长度分别403、309、607 bp;对RT-PCR扩增产物分别切胶回收进行PCR产物测序进一步验证.结果:①应用Multi RT-PCR方法对11例大鼠及11例人肝细胞癌组织进行检测,琼脂糖电泳结果显示各基因产物条带清晰、无引物二聚体产生、无非特异性扩增产物,并对各基因产物片段分别切胶测序得到证实;②对22例肝癌组织检测结果表明在肝癌组织中ERK1、JNK1、p38mRNA阳性率分别为95.83%、100%、100%,且在表达丰度上有明显的变化.结论:所建立的MAPK Multi RT-PCR检测方法具有特异性强、效率高、简单易行、可靠的特点,对MAPK信号转导通路在疾病中的作用研究具有较强的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹骥	广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部	68	278	9.0	11.0
2	苏建家	广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部	41	273	10.0	14.0
3	陈茂伟	广西医科大学第一附属医院传染病学科	75	276	9.0	12.0
4	焦杨	广西医科大学药理学教研室	78	866	17.0	24.0