抑制血管内皮生长因子表达的pSUPER-H1 RNA干扰系统的构建

• 作者: 惠国桢 王元元 胡锦 董万利 蒋觉安
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: pSUPER质粒 RNA干扰 小干扰RNA 短发夹RNA 血管内皮生长因子
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 333-336
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2783字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3685.2006.04.014

摘要

目的构建抑制血管内皮生长因子(VEGF)活性的小干扰RNA表达载体.方法构建含有PolⅢ H1启动子的pSUPER-H1质粒,化学合成3对编码短发夹RNA的寡核苷酸序列,各64个碱基,退火、克隆到经BglⅡ、HindⅢ酶切处理的pSUPER-H1质粒PolⅢ H1启动子下游,获得重组pSUPER-H1-VEGF质粒,转化感受态大肠杆菌,挑选阳性克隆,抽取重组质粒,EcoRⅠ、HindⅢ双酶切电泳、测序鉴定.结果重组质粒经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切琼脂糖凝胶电泳分析,表明64个碱基的核苷酸序列成功插入到预计位点,经测序鉴定,序列完全一致.结论重组pSUPER-H1-VEGF载体成功构建,开展了质粒介导在体内表达siRNA的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡锦		36	209	8.0	11.0