西罗莫司诱导人肝癌细胞株BEL-7402凋亡及其机制

• 作者: 张俊峰 李华 杨扬 蔡常洁 陆敏强 陈规划
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 西罗莫司 肝肿瘤 细胞凋亡 线粒体
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 583-586
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3560字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2006.10.002

摘要

目的 探讨西罗莫司(SRL)在体外诱导人肝癌细胞株BEL-7402的凋亡作用及其机制.方法 以不同浓度的SRL(5、10、20、30、40和50nmol/L)作用于体外培养的人肝癌细胞株BEL-7402,应用流式细胞仪检测培养24、48和72 h时的细胞凋亡情况;Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化;Western Blot法观察BEL-7402细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bcl-xl和Bax基因的表达变化;采用Caspase-3试剂盒检测Caspase-3酶的活性;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(△ψm).结果 SRL可诱导BEL-7402细胞凋亡,并与药物浓度和作用时间呈正相关.SRL作用BEL-7402细胞后48 h,在Hoechst 33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,凋亡过程中线粒体膜电位下降及Caspase-3酶原蛋白激活,伴有Bcl-2、Bcl-x蛋白表达的降低和Bax蛋白上调.结论 SRL能使抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl表达降低,促凋亡蛋白Bax表达上调,线粒体膜电位下降,激活Caspase-3酶原蛋白,从而诱导细胞凋亡.