人端粒酶逆转录酶诱导的猪肝细胞初步鉴定

• 作者: 曹红翠 李兰娟 李君 杜维波 潘小平 盛国平 章益民 陈瑜
• 来源期刊: 浙江医学
• 学科: 农学
• 关键词: 人端粒酶逆转录酶 猪肝细胞 生物人工肝支持系统 永生化
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 103-105,109
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 3666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2785.2006.02.009

摘要

目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性.方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表达的载体转染到原代猪肝细胞,经G418硫酸盐筛选,获得耐药性的猪肝细胞克隆并传代3代.观察原代猪肝细胞和hTERT诱导后的猪肝细胞的形态,检测两种猪肝细胞不同时期培养上清液中白蛋白、尿素氮的浓度.结果每只肝脏的肝细胞产量约为2.0×1010个,具有活力的肝细胞所占百分比为(95.5±3.2)%.原代猪肝细胞和hTERT诱导的猪肝细胞培养上清中分泌白蛋白和尿素氮在前3天无统计学差异(P＞0.05),第4、5天差异有统计学意义(P＜0.05).结论四步灌流法分离获取的猪肝细胞产量高、功能活性好.hTERT诱导的猪肝细胞具有正常肝细胞的基本功能,可作为生物人工肝及细胞移植等的理想的细胞源.