肺炎衣原体单克隆抗体的研制和应用

• 作者: 李雪萍 王卫群 钱利生 陈园园 陈学勤
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎衣原体单抗 免疫荧光试验 肺炎衣原体主要外膜蛋白 外周血单核细胞
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 362-366
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 5354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2006.03.017

摘要

目的:以杂交瘤技术制备抗肺炎衣原体(Cpn)单克隆抗体,用于衣原体感染的诊断及相关疾病的研究.方法:以进口Cpn抗原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾脏细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA法筛选抗体阳性杂交瘤细胞.收集接种过杂交瘤细胞的小鼠腹水,分别用ELISA法检测抗体效价、用免疫琼脂扩散试验鉴定单抗的类别、用微量荧光免疫试验(MIF)检测单抗的种属特异性.用克隆表达的主要外膜蛋白(MOMP)通过Dot-ELISA法分析单抗的特异性.通过建立直接免疫荧光法(DIF)检测病人和正常人外周血单核细胞(PBMC)标本,并进行统计处理.结果:小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞的融合率为61.46%(236/384),最终获得4株稳定分泌Cpn单抗的细胞株.用ELISA法检测小鼠腹水,效价高者可达1:100 000.免疫琼脂扩散试验鉴定为IgG类单抗,扩散效价达1:128.自制单抗能与重组MOMP发生结合反应,表明其为抗Cpn MOMP抗体.自制单抗与进口单抗类似,即与鹦鹉热衣原体(Cps)出现一定程度的交叉反应,而与沙眼衣原体(Ct)则无交叉反应.对240份PBMC标本用自制单抗和进口单抗同时检测Cpn抗原,2种单抗检测均阳性的共86份,经SPSS软件分析两者具有较好的一致性.DIF检测显示,心血管疾病和呼吸道疾病Cpn抗原阳性检出率分别为69.34%(95/137)和72.06%(49/68),与正常人标本Cpn抗原阳性率相比,均具有显著性差异.结论:获得IgG类抗Cpn MOMP单抗,自制Cpn单抗的特异性和敏感性均与进口单抗具有较好的一致性.PBMC Cpn抗原检测的统计分析证实,对于动脉粥样硬化等某些疾病的发生和发展,Cpn感染可能是重要的原因之一,但其中的因果关系还有待深入研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱利生	复旦大学上海医学院病原生物系	19	89	6.0	8.0
2	王卫群	复旦大学附属金山医院心内科	30	119	7.0	9.0
3	李雪萍	复旦大学上海医学院病原生物系	13	50	4.0	6.0
4	陈学勤	复旦大学上海医学院病原生物系	5	11	2.0	3.0
5	陈园园	复旦大学上海医学院病原生物系	6	9	2.0	3.0