利用流式细胞仪检测人外周血NK细胞毒性方法的建立

• 作者: 季明春 张俊 胡茂志 钱亚云 龚卫娟
• 来源期刊: 实用临床医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流式细胞仪 NK细胞 细胞毒性 K562-EGFP
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-31,35
• 页数: 5页
• 分类号: R730.5
• 字数: 3946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2006.07.011

摘要

目的 利用流式细胞仪(FACS)技术检测人外周血NK细胞的毒性.方法 首先将pEGFP-N1质粒转染人NK细胞的天然靶细胞K562, 经过G418筛选后进一步单克隆化,得到稳定、均一表达绿色荧光蛋白的K562细胞.取对数期的K562-EGFP细胞与人外周血单个核细胞分别按5∶1、10∶1、20∶1、40∶1的比例混合,分别孵育0.5、1、2、4 h后用碘化丙啶(PI)标记,用流式细胞仪分析呈红、绿色荧光的细胞数,最后计算NK细胞的杀伤效率.结果 0.5、1、2、4 h均能得到明显的杀伤效果,而且以2h的杀伤率最高.此时杀伤率与传统乳酸脱氢酶法(LDH)具有显著相关性(γ＝0.997, P=0.003), 而且显示出更强的敏感性.结论 利用流式细胞仪检测NK细胞毒活性的方法可作为传统51Cr释放法、LDH法的一个补充,而且具有经济、快速和敏感的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张俊	江苏省扬州市第四人民医院检验科	31	29	3.0	4.0
2	季明春	扬州大学医学院免疫学教研室	80	256	7.0	12.0
3	龚卫娟	扬州大学医学院免疫学教研室	81	302	10.0	13.0
4	胡茂志	扬州大学测试中心	33	202	7.0	12.0
5	钱亚云	扬州大学医学院免疫学教研室	39	83	5.0	7.0