ERK1/2丝裂原活化蛋白激酶对醛固酮促进肾小管上皮细胞合成转化生长因子β1的作用

• 作者: 罗洋 芮宏亮 谌贻璞
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 醛固酮 肾小管 转化生长因子β
• 年，卷（期）: 2006,（44）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3133-3137
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3743字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2006.44.009

摘要

目的 探讨ERK1/2丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径在醛固酮(ALDO)促进肾小管上皮细胞系(HKC)合成转化生长因子β1(TGF-β1)中的作用.方法 利用体外培养的HKC细胞行如下试验.(1)不同浓度MAPK三种支通路特异性阻滞剂对其分别进行阻断,以酶联免疫吸附方法(ELISA)检测外源性ALDO作用下HKC合成TGF-β1量的改变.(2)不同浓度及不同作用时间的外源性ALDO刺激HKC,以Western印迹方法检测细胞裂解物中磷酸化ERK1/2以及总ERK1/2表达,并对ERK1/2相对表达量(磷酸化ERK1/2/总ERK1/2)与相应刺激条件下TGF-β1合成量进行相关分析.(3)在不同浓度的安体舒通和糖皮质激素受体阻滞剂RU486作用细胞后,以外源性ALDO刺激HKC,同上方法检测细胞裂解物中磷酸化ERK1/2及总ERK1/2表达.结果 (1)15μmol/L及25μmol/LERK1/2通路阻滞剂(U0126)分别使TGF-β1的合成量减低至(87±11)pg/ml及(75±19)pg/ml,而仅使用10-7mol/L ALDO刺激作用下HKC中TGF-β1的合成量(121±10)pg/ml,与前者比较差异有统计学意义(P＜0.05),而JNK和P38两条支通路阻滞剂(SP600125、SB203580)未使TGF-β1合成量出现显著性变化(均P＞0.05).(2)外源性ALDO可使HKC对ERK1/2相对表达量呈现剂量依赖性增加.10 -9及10-7mol/L ALDO刺激组ERK1/2相对表达量分别为0.67±0.06及0.80±0.05,显著高于0 mol/L ALDO组(P＜0.05或0.01).相应浓度醛固酮刺激下ERK1/2相对表达量与TGF-β1合成量之间具有显著正相关关系(R=0.793,P＜0.01);10-7mol/L ALDO刺激HKC 15 min后,磷酸化ERK1/2开始出现显著性增加并达到高峰(P＜0.01),其相对表达量为0.84±0.06,此后逐渐减低,至360min时其表达量为0.49±0.08,与0min比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)10-7mol/L ALDO与10-9、10-7mol/L安体舒通共同孵育HKC 30 min,可使ERK1/2的相对表达量分别为0.62±0.08及0.60±0.04,显著低于0 mol/L安体舒通组(P＜0.05或P＜0.01),但其表达量仍显著高于未加任何刺激的对照组(P＜0.05);10-7mol/L ALDO与相应浓度的RU486共同刺激HKC 30 min未使ERK1/2相对表达量显著低于0 mol/L RU486组(P＞0.05).结论 ERK1/2信号转导通路可能是介导醛固酮促HKC合成TGF-β1的主要通路之一,醛固酮与胞质内受体结合是其通过活化ERK1/2途径而发挥上述病理作用的重要条件.