转染BIG-3基因的人骨髓基质干细胞向软骨细胞诱导分化的实验研究

• 作者: 刘建 孟国林 张大伟 戴洪山 李丹 李立文 胡蕴玉 马兴
• 来源期刊: 中华创伤骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: BIG-3基因 人骨髓基质干细胞 软骨诱导 重组人骨形态发生蛋白-2
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 760-763
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 4012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-7600.2006.08.017

摘要

目的 研究转染BIG-3基因对人骨髓基质干细胞(hBMSCs)向软骨细胞诱导分化的影响.方法 将构建好的pMSCVpuro-BIG-3转染至建系的hBMSCs,5 μg/mL嘌罗霉素筛选12 d后,扩增并收集细胞,电泳证实特定条带无误.实验分三组:hBMSCs-BIG-3组、hBMSCs-EV组和hBMSCs组,每组重复6次,将三组细胞制成微粒模拟三维培养模式,分别加入浓度为400 ng/mL的重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)作用14d后,检测甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原mRNA,利用MPS60病理图象分析系统采集图像,并进行灰度分析,半定量比较基质表达量.结果 灰度值:hBMSCs-BIG-3组为684 481 822,hBMSCs-EV组为439 101 780,hBMSCs组为441 082 183,hBMSCs-BIG-3组灰度值明显高于后两组(P＜0.05),hBMSCs-EV组和hBMSCs组之间差异无显著性意义(P=0.862).结论 BIG-3基因有助于hBMSCs向软骨细胞诱导分化.