转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞抗人血清溶破实验

• 作者: 刘秉乾 张玥 李胜芝 王广有 马志方 马腾骧
• 来源期刊: 中华泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 移植,异种 岩藻糖基转移酶类
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 537-540
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 3018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1000-6702.2006.08.009

摘要

目的 研究转人α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因克服异种移植超急排斥反应(HAR)的作用.方法 构建pcDNA3-HTcDNA重组质粒,体外培养猪动脉内皮细胞(PAEC),脂质体转染法将pcDNA3-HTcDNA转染PAEC,新霉素(G418)筛选具有抗性的细胞克隆,PCR检测重组基因的整合,流式细胞术(FCM)检测转染细胞H抗原和异种抗原α-Gal表达.分别以未转染的PAEC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作对照.将转染细胞和正常细胞分别以20%、40%和60%人血清孵育2 h,比较溶破细胞百分数.结果 重组质粒转染PAEC经筛选得到抗性细胞克隆,PCR扩增出人HT基因片段,FCM检测正常PAEC与转染PAEC,α-Gal平均荧光强度由1346.81降至194.44,H抗原平均荧光强度由9.10增至215.93;α-Gal M2区由99.98%降至37.18%,H抗原M2区由13.80%升至78.54%.转染细胞以人血清孵育后溶破细胞百分数较正常细胞降低,分别由(32.32±2.37)%、(59.54±4.56)%和(71.46±5.94)%降至(15.78±2.69)%、(30.16±1.46)%和(40.48±3.77)%,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).结论 转人HT基因PAEC α-Gal表达明显降低,H抗原表达升高,对人血清溶破的耐受性增强.转人HT基因可以一定程度抑制HAR.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马志方	山西医科大学第一附属医院外科	52	135	5.0	7.0