白念珠菌菌相转换基因HYR1上游N-乙酰葡萄糖胺激活序列的初步定位

• 作者: 刘晓刚 廖万清 汪晓军 温海 潘炜华 陈孙孝 陈江汉 顾菊林
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 白念珠菌 菌相转换基因 N-乙酰葡萄糖胺
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 794-796
• 页数: 3页
• 分类号: R379.4
• 字数: 2824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2006.07.027

摘要

目的:对白念珠菌菌相转换基因HYR1上游N乙酰葡萄糖胺激活序列进行初步定位,探讨菌相转换可能的调控机制.方法:DNAssist 2.0软件分析HYR1基因上游1 800 bp内可能的N-乙酰葡萄糖胺激活序列片段,选择-1 800～+43bp、-1 400～+43 bp、-1 000～+43 bp、-600～+43 bp、-400～+43 bp、-200～+43 bp这些区域作为分析目标,PCR扩增这些片段,将其分别克隆至含β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因的载体PNG17中构建质粒重组体,分别命名pHYR1.8、pHYR1.4、pHYR1.0、pHYR 0.6、pHYR0.4、pHYR0.2,测序确认后转化酵母菌EGY48,培养含有不同重组体的酵母转化子,将不同的酵母转化子接种于含有N乙酰葡萄糖胺和β-半乳糖苷(X-gal)的培养基上,在不同条件下观察培养基的颜色变化.结果:成功构建6种重组体pHYR1.8、pHYR1.4、pHYR1.0、pHYR 0.6、pHYR0.4、pHYR0.2,经测序,插入片段与预期序列完全一致.酵母菌转化子生长良好,在N-乙酰葡萄糖胺作用下,含pHYR1.8和pHYR1.4的转化子使培养基成蓝色,含其他重组体pHYR1.0、pHYR 0.6、pHYR0.4、pHYR0.2的转化子不使培养基显色.结论:N-乙酰葡萄糖胺可能通过HYR1上游-1 400～-1 000 bp区域内的启动元件激活HYR1基因诱导白念珠菌菌相转换.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温海	第二军医大学长征医院皮肤科	241	1311	16.0	24.0
2	顾菊林	第二军医大学长征医院皮肤科	72	377	10.0	16.0
3	廖万清	第二军医大学长征医院皮肤科	176	920	16.0	22.0
4	潘炜华	第二军医大学长征医院皮肤科	55	230	8.0	12.0
5	陈江汉	第二军医大学长征医院皮肤科	81	257	9.0	10.0
6	刘晓刚	第二军医大学长征医院皮肤科	20	128	7.0	11.0
7	陈孙孝	第二军医大学长征医院皮肤科	36	104	6.0	9.0
8	汪晓军	第二军医大学长征医院皮肤科	10	34	3.0	5.0