血清淀粉样P成分转基因小鼠模型的建立

• 作者: 张英汉 耿建国 辛亚平 郭云云
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 血清淀粉样P成分 显微注射 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2006,（17）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 4242-4244
• 页数: 3页
• 分类号: Q343.1
• 字数: 3386字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2006.17.023

摘要

目的:建立可表达血清淀粉样P成分(SAP)转基因小鼠模型,以研究SAP基因的功能.方法:采用基因重组技术将SAP基因插入到pCMV-Tag5A真核表达载体上.经BciⅥ限制性内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳回收2.7kb目的片断,受精卵原核显微注射法将其注入雄原核,制备转基因小鼠.采用PCR法在基因水平筛选SAP转基因小鼠阳性小鼠;免疫沉淀法结合免疫印迹法在蛋白水平检测SAP基因在PCR阳性转基因小鼠中的表达情况.结果:成功构建了pCMV-Tag5A/mSAP真核表达载体.经显微注射法将2.7kb线性目的基因片断注射入受精卵雄原核,移植入代孕母鼠,所生127只小鼠,其中PCR鉴定获得10只转基因阳性小鼠.免疫沉淀法和免疫印记法随机检测83#♂founder、7#♀founder与C57 BL/6J小鼠回交F1代PCR阳性转基因小鼠血清中外源SAP基因蛋白水平的表达,发现均有表达.结论:该研究以C57BL/6J小鼠为研究对象,成功地产生能稳定遗传SAP基因的过表达转基因小鼠模型,它将有利于研究SAP基因在炎症、淀粉样沉淀、自身免疫系统中的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张英汉	西北农林科技大学动物科技学院	57	610	15.0	22.0
2	辛亚平	西北农林科技大学动物科技学院	93	442	10.0	15.0
3	耿建国	中国科学院生化细胞所	8	8	2.0	2.0
4	郭云云	西北农林科技大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0