核干细胞因子特异性短发夹状RNA对HL-60细胞分化抗原和生物学性质的影响

• 作者: 刘帅 孙玲 岳保红 张功员 张秋堂 张钦宪 朱晓燕 王清霞 赵小强
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 核干细胞因子 短发夹状RNA 分化抗原 生物学性质 增殖 分化 HL-60细胞
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1191-1194
• 页数: 4页
• 分类号: R394.3|R730.23|R733.7
• 字数: 4331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.11.019

摘要

目的研究核干细胞因子(nucleostemin,NS)特异性短发夹状RNA(shRNA)阻断NS基因表达对HL-60白血病细胞分化抗原及生物学性质的影响,探讨NS的生物学功能和与急性白血病的关系以及用于基因治疗的可能性.方法特异性转染试剂和合成的NS短发夹状RNA(NS-shRNA)体外直接转染HL-60细胞,采用RT-PCR判断基因阻断效果, MTT法测定转染后细胞增殖能力,流式细胞仪(FCM)测定细胞分化抗原,形态学观察细胞形状和生长状态,血细胞分析仪测定细胞大小、粒度.结果合成的2条NS-shRNA均能明显阻断NS基因表达,抑制率分别为37.82%和71.88%;NS-shRNA能显著抑制HL-60细胞的增殖并存在时间和浓度依赖性,以48 h和10 nmol/L浓度最佳.转染后:分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化趋势;细胞聚团性减弱,碎片增多,一部分细胞形态变成梭形和长尾形,染色后细胞核紧密,凹陷,髓过氧化物酶(MPO)和α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)活性增强;大小和粒度分析小体积细胞和核碎裂细胞增多.结论 NS-shRNA通过阻断NS基因表达,对HL-60细胞有抑制增殖和促分化作用,改变了细胞的生物学性质,使细胞恶性程度有所减弱,并有可能诱发凋亡,在白血病的基因中具有潜在的临床价值.