重组人SMAC及SMAC-PTD的制备

• 作者: 何凤田 李蓉芬 胡大强 胡颖 高会广 黄刚 龚薇
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SMAC 蛋白转导域 凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 958-960
• 页数: 3页
• 分类号: Q503|Q51
• 字数: 3077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.09.028

摘要

目的制备重组人SMAC及SMAC-PTD.方法经RT-PCR从人HeLa细胞中扩增人野生型SMAC及SMAC-PTD cDNA,分别构建于原核表达质粒pET28a(+),测序正确后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni2+-NTA层析纯化,SDS-PAGE和Western blot鉴定目的蛋白.结果RT-PCR扩增分别得到编码人SMAC及SMAC-PTD cDNA片断,测序结果正确,重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达.结论成功制备了高纯度的人野生型SMAC及SMAC-PTD融合蛋白,为进一步研究奠定了基础.