p65结合肽与p65的亲和力检测及其对NF-κB DNA结合活性抑制作用的鉴定

• 作者: 刘东擘 史海水 吴强 徐祥 朱佩芳 梁华平 王正国 胡湘南 郑江
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: NF-κB p65 生物传感器 多肽
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 621-625
• 页数: 5页
• 分类号: Q503|Q51|Q58
• 字数: 5190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.07.002

摘要

目的检测NF-κB p65亚基结合肽与p65间相互作用的亲和常数,以及其对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.方法借助于生物传感器技术分析NF-κBp65亚基结合肽与p65相互作用的动力学,同时应用竞争性ELISA鉴定结合多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.结果生物传感器技术分析结果表明5条p65结合肽均能与p65发生相互作用,相互作用的亲和常数分别为GST-BPT1:2.67×10-7mol/L、GST-BPT2:9.02×10-6mol/L、GST-BPT3:1.07×10-6mol/L、GST-BPT4:8.03×10-6mol/L、GST-BPT5:9.83×10-7mol/L.竞争性ELISA检测结果表明5条p65结合肽均能在一定程度上抑制NF-κB与其顺式作用元件κB基序的结合,且这种抑制效应随多肽浓度的增加而增强.结论酵母双杂交筛选获得的5条p65结合多肽与p65间确实存在相互作用,且5条结合肽对NF-κBDNA结合活性均有一定的抑制效应,由此提示以这些多肽为先导物设计和开发靶向NF-κB的抗炎多肽药物将成为可能.