大鼠细胞色素P450-2J3基因的克隆及其在293细胞中的表达

• 作者: 李仁立 汪道文 王明太 闫哲
• 来源期刊: 中原医刊
• 学科: 医学
• 关键词: CYP2J3 基因克隆 聚合酶链反应 转染 基因表达 重叠延伸聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2006,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3078字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-4756.2006.07.003

摘要

目的克隆大鼠CYP2J3基因并构建pcDNA 3.1(+)-CYP2J3真核表达载体,检测其在293细胞中的表达.方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链反应(0E-PCR)扩增大鼠CYP2J3基因,克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(+).脂质体转染293细胞,用Western lbotting鉴定其在293细胞表达.结果运用RT-PCR和0E-PCR获得CYP2J3基因开放读码框架(0RF)全长序列,经酶切鉴定正确.测序结果与基因Gen Bank提交序列完全一致并成功构建真核表达载体pcDNA 3.1(+)-CYP2J3.Western blotting结果显示,转染pcDNA 3.1(+)-CYP2J3后的293细胞能稳定有效表达CYP2J3蛋白.结论大鼠CYP2J3基因的成功克隆以及pcDNA3.1(+)-CYP2J3载体的成功构建,为CYP2J3基因的功能研究和相关疾病的研究提供了可行的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪道文		177	1061	17.0	24.0
2	李仁立		21	62	5.0	7.0
3	王明太	郑州大学第二附属医院急诊科	32	105	5.0	9.0
4	闫哲		1	0	0.0	0.0