PCI-hTGF-β1转染体外培养成人退变椎间盘细胞及其表达产物的测定

• 作者: 孙绍伟 张雷 胡有谷 郑洪军 陈康 陈聪
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 椎间盘 细胞培养 转化生长因子β/遗传学 转染
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 141-143
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 2258字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.05.024

摘要

背景:人转化生长因子β1基因可用于椎间盘退变的基因治疗,但有效载体的构建是实验的关键.目的:测定真核表达载体PCI-hTGF-β1转染体外培养成人退变椎间盘细胞可否表达产物人转化生长因子β1,为椎间盘退变的基因治疗提供实验基础.设计:单一样本实验.单位:山东省创伤骨科研究所,一所市立医院骨科.材料:实验于1999-10/2001-01在山东省创伤骨科研究所实验室进行.椎间盘标本均为椎间盘突出症患者手术中取材(获患者知情同意).标本1为30岁女性的L4/5椎间盘,标本2为38岁女性的L5/S,椎间盘.方法:①培养成人退变椎间盘细胞:标本离体30 min内取回实验室,收集原代培养的纤维环细胞和髓核细胞.②转染:将细胞置于24孔培养板中,每孔细胞数目在5.5×105 个,应用构建的PCI-hTGF-β1真核表达载体对其进行转染,并设立转染PCI组和未转染组.③用免疫组织化学方法对转染48 h后的细胞进行表达产物测定.主要观察指标:两个标本中,各组原代纤维环细胞和髓核细胞中真核表达载体PCI-hTGF-β1的阳性细胞产物的吸光度值比较.结果:①标本1:原代纤维环细胞和原代髓核细胞中真核表达载体PCI-hTGF-β1的阳性细胞产物的吸光度值为PCI组的3.49,3.69倍,为未转染组的3.55倍.②标本2:原代纤维环细胞和原代髓核细胞中真核表达载体PCI-hTGF-β1的阳性细胞产物的吸光度值为PCI组的3.56,3.46倍,为未转染组的3.43,3.33倍.结论:PCI-hTGF-β1是人转化生长因子β1基因在体外培养退变椎间盘细胞转染中有效的真核表达载体,可以成功转染体外培养的成人退变椎间盘细胞,并可获得人转化生长因子β1基因产物的高表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈聪	威海市立医院骨科	25	60	5.0	7.0
2	陈康	威海市立医院骨科	6	14	3.0	3.0
3	胡有谷		6	12	2.0	3.0
4	孙绍伟	威海市立医院骨科	12	13	2.0	3.0
5	张雷	威海市立医院骨科	1	0	0.0	0.0
6	郑洪军		2	0	0.0	0.0