摘要:
目的:分离培养兔脂肪间充质干细胞,探讨兔脂肪间充质干细胞在体外向神经细胞分化的能力.方法:实验于2002-09/2005-09在陕西省干细胞工程技术研究中心完成.选取清洁级新西兰大白兔5只,采用Ⅰ型胶原酶消化兔腹股沟皮下脂肪组织,分离培养脂肪间充质干细胞.取生长状况良好的第2,5,10代细胞,绘制生长曲线,计算细胞群体倍增时间.采用免疫组化方法对脂肪间充质干细胞表面分子标志[CD14,CD29,CD34,CD44,CD45,CD105及人白细胞抗原DR亚类(群)]进行鉴定,并采用1,2.5,5,10 mmol/L不同浓度的β-巯基乙醇检测脂肪间充质干细胞向神经细胞分化的能力.结果:①脂肪间充质干细胞生长曲线分析:第2,5,10代细胞体外传代培养的潜伏期约为24~48 h,传代培养细胞的对数增殖期为6 d,接种后第9天进入平台期.在细胞生长的对数期,脂肪间充质干细胞的倍增时间为64.12 h.②脂肪间充质干细胞分子特征的鉴定结果:第2~5代细胞90%以上CD29,CD44,CD105呈阳性表达,而不表达CD14,CD34,CD45及人白细胞抗原DR亚类(群)等表面分子标记.③脂肪间充质干细胞向神经细胞分化情况:体外能够分化为神经细胞.结论:兔脂肪组织可分离培养出脂肪间充质干细胞,并能够向神经细胞分化,有望成为组织工程的种子细胞来源.