抑制性消减杂交法筛选植入人发角蛋白与单纯脊髓损伤大鼠基因表达的差异

• 作者: 徐锡金 朴仲贤 朴英杰 林新华 霍霞
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤 角蛋白 基因
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 分类号: R651.2
• 字数: 5531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2006.08.039

摘要

目的:采用抑制性消减杂交筛选植入人发角蛋白大鼠损伤脊髓基因性差异表达.方法:实验于2004-11在汕头大学中心实验室进行.分别从植入人发角蛋白损伤组与单一损伤对照组4thw组织中提取mRNA,反转录成双链cDNA,经RsaI酶切、接头连接、两次消减杂交和两次抑制性聚合酶链扩增,而后将消减cDNA产物进行T/A克隆和测序分析.结果:所获植入人发角蛋白脊髓损伤组织差异表达基因的消减cDNA产物散布在280～800bp范围.经蓝白筛选和酶切鉴定,共得到232个阳性克隆.对其中20个做测序分析获得了氨基酸转运蛋白系统A2(Ata2)、细胞色素氧化酶Ⅲ(COXⅢ)、抗过氧化物蛋白5(Prd5)、Tap1蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cst3)等5个表达蛋白.结论:prd 5、Ata2和COXⅢ分别通过参与脊髓损伤后抗氧化损伤过程,起到抑制自由基、兴奋性氨基酸的产生,减轻Ca离子紊乱的程度,降低了继发性损害对脊髓组织的二次损伤程度;而Tap1蛋白和Cst3则参与人发角蛋白的降解过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朴英杰	南方医科大学组织胚胎学教研室	20	70	5.0	7.0
2	霍霞	汕头大学医学院中心实验室	125	898	17.0	24.0
3	徐锡金	汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室	97	527	12.0	19.0
4	朴仲贤	汕头大学医学院中心实验室	23	49	4.0	5.0
5	林新华	汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室	1	2	1.0	1.0