RDPCR检测DNA损伤定位于核苷酸水平的研究

• 作者: 叶运莉 帅培强 文卫华 衡正昌 饶朝龙 高绪芳
• 来源期刊: 卫生研究
• 学科: 医学
• 关键词: 依赖随机化末端连接物PCR DNA损伤 定位检测 核苷酸
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 159-162
• 页数: 4页
• 分类号: Q-331|R99|Q783.1|Q524
• 字数: 2966字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8020.2007.02.009

摘要

目的 简化RDPCR建立程序,并在核酸序列水平精确定位DNA损伤. 方法 培养TK6细胞,抽提基因组DNA,制备k-ras基因外显子2的单链探针.扩增k-ras基因外显子2(以下称短片段).酶切短片段和基因组DNA构建损伤模型,前者经依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)扩增,每一步产物作凝胶电泳,终产物与单链探针杂交显色,并进行测序;后者以短片段建立的实验条件进行RDPCR扩增,产物与单链探针杂交显色,并进行测序. 结果 凝胶电泳可见酶切短片段在RDPCR中每一步骤的目的 产物条带;酶切短片段和酶切基因组DNA的RDPCR产物均在相应位置出现杂交条带,测序证实损伤均位于Hinfl在k-ras外显子2上的酶切位点. 结论 短片段建立RDPCR的实验条件简单易行;并首次利用RDPCR检测DNA损伤精确定位于核酸序列水平的碱基位置.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	衡正昌	四川大学华西公共卫生学院	46	370	11.0	16.0
2	高绪芳		26	119	5.0	10.0
3	饶朝龙		32	84	6.0	8.0
4	叶运莉	四川大学华西公共卫生学院	10	80	6.0	8.0
5	帅培强		5	7	1.0	2.0
6	文卫华	四川大学华西公共卫生学院	6	17	2.0	3.0