珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化

• 作者: 廖明尧 杨敬元 梁宏伟 熊丹 王玉兵 陈发菊
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 植物学 香果树 基因组DNA 随机扩增多态性DNA
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 页码范围: 279-283
• 页数: 5页
• 分类号: S718.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2007.03.006

摘要

以采自湖北省神农架地区的14株香果树Emmenopterys henryi为材料,提取其叶片基因组DNA,并以其基因组DNA为模板进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应条件的优化.RAPD反应条件中的各个因子,包括模板DNA质量浓度、引物浓度、dNTP浓度、DNA聚合酶浓度和Mg2+浓度.结果表明,香果树基因组DNA在以下条件有较好的扩增效果:25 μL体系中,Taq酶1.33×10-3 kat·L-1;随机引物0.5 μmol·L-1;Mg2+ 2.6 mmol·L-1;dNTP 220 μmol·L-1;DNA模板4.40 mg·L-1.聚合酶链式反应(PCR)程序为:94 ℃预变性5 min,94 ℃变性1 min,43 ℃退火1 min,72 ℃延伸2 min,经过40个循环,最后72 ℃延伸8 min.此体系和反应程序可获得比较稳定的扩增结果.图6表1参8