珍稀濒危植物香果树ISSR-PCR反应体系的筛选与优化

• 作者: 李钧敏 金则新
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 香果树 ISSR-PCR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 林学
• 页码范围: 458-461
• 页数: 4页
• 分类号: QS718.43
• 字数: 3000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-352X.2006.04.004

摘要

以珍稀濒危植物香果树(Emmenopterys henryi)基因组DNA为研究对象,测试了ISSR-PCR反应体系的最适退火温度,并通过对反应体系中的Mg2+、dNTP浓度、模板DNA含量,Taq DNA聚合酶量、BSA浓度、引物浓度的筛选和优化,获得了香果树ISSR分析较适宜的扩增条件是:10 μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris·HCl pH9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1%Triton X-100),2.0 mmol·L-1 MgCl2,0.75 U Taq酶,10 ng模板DNA,12 pmol引物;dATP、dCTP 、dGTP 、dTTP 各0.2 mmol·L-1,2 mg·mL-1牛血清白蛋白.香果树的合适退火温度为48.5℃.