濒危植物长叶榧ISSR-PCR反应体系的建立

• 作者: 李钧敏 金则新
• 来源期刊: 西北林学院学报
• 关键词: 长叶榧 ISSR PCR反应体系
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 林木育种与培育
• 页码范围: 94-97
• 页数: 4页
• 分类号: S722.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7461.2006.05.022

摘要

以国家2级保护植物长叶榧为材料,对ISSR反应体系中的各个主要影响因子进行了优化筛选,建立了长叶榧ISSR-PCR的反应体系,其较适宜的扩增条件为:10μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris·HCl pH9.0,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100),1.5mmol/L MgCl2,1U Taq酶(上海华美公司),10 ng模板DNA,6 pmol引物(上海Sangon公司);dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.2 mmol/L,合适的退火温度为52.4℃.PCR反应体系的建立为ISSR技术分析长叶榧遗传多样性奠定了良好的基础.