珠子参ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作者: 刘超 刘银环 宋小妹 崔九成 杨新杰 王薇 许苗苗
• 来源期刊: 西北药学杂志
• 关键词: 珠子参 基因组DNA ISSR反应体系 遗传多样性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 倡中药及天然药物倡
• 页码范围: 551-554
• 页数: 4页
• 分类号: R282
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-2407.2014.06.001

摘要

目的：建立珠子参的ISSR-PCR适宜扩增反应体系和程序，为其深入研究奠定基础。方法采用新型植物基因组DNA提取试剂盒提取珠子参总DNA ，并用正交设计实验对其ISSR反应体系条件进行筛选及优化。结果提取的基因组DNA纯度和完整性较好，A260/A280值在1．8～2．0之间，DNA无降解现象，可满足ISSR-PCR扩增要求。珠子参ISSR分析的最适反应体系为：在20μL PCR反应体积中，含10 ng模板DNA、0．20 mmol · L -1 dNTPs、1．5μmol · L -1引物、3 U TaqDNA 聚合酶、2μL 10× PCR Buffer、3 mmol · L -1 M g2＋。扩增程序为：95℃预变性5 min ，94℃变性30 s ，58℃退火30 min ，72℃延伸1 min ，循环40次，72℃延伸10 min。由此可获得带型丰富和清晰可辨的DNA指纹图谱。结论建立的ISSR-PCR反应体系可用于研究珠子参的遗传变异和遗传多样性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋小妹		150	760	15.0	19.0
2	崔九成		45	326	10.0	15.0
3	杨新杰		41	137	8.0	10.0
4	王薇		70	273	10.0	14.0
5	许苗苗		13	38	4.0	5.0
6	刘超		7	44	5.0	6.0
7	刘银环		6	13	2.0	3.0