应用均匀设计优化文冠果ISSR-PCR反应体系

• 作者: 刘晶晶 张芸香 白晋华 郭晋平 郭红彦
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: 文冠果 ISSR-PCR 均匀设计
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 林学与园艺
• 页码范围: 241-244,248
• 页数: 5页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文

摘要

采用均匀设计,对引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg2+浓度和dNTP浓度4个因素分别设置5个水平,对文冠果ISSR-PCR反应体系进行优化,在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测,构建了文冠果ISSR-PCR优化反应体系,在20 μL ISSR-PCR反应体系中,各因素的最佳浓度分别为:2×PCR buffer、0.2mmol·L-1dNTP、0.3μmol·L-1引物、2.5 mmol·L-1 Mg2+和0.4 U TaqDNA聚合酶,进一步对扩增程序中的循环次数和退火温度,以及ISSR引物进行筛选,获得的扩增程序为:94℃预变性5 min,接着进行40个循环:94℃变性35s,52～56℃退火35 s,72℃延伸45 s;循环结束后,72℃延伸10 min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张芸香	山西农业大学林学院	94	1243	20.0	32.0
2	郭晋平	山西农业大学林学院	148	2033	24.0	39.0
3	刘晶晶	山西农业大学林学院	7	43	4.0	6.0
4	郭红彦	山西农业大学林学院	17	61	5.0	6.0
5	白晋华	山西农业大学林学院	40	212	7.0	13.0