均匀设计优化建兰ISSR-PCR体系

• 作者: 孙端 李锦凤 胡薇 饶春荣 黄儒珠
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 建兰 ISSR-PCR 均匀设计
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: Q949.662
• 字数: 4702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2007.01.012

摘要

采用均匀设计,对影响建兰ISSR-PCR体系的引物、Mg2+、dNTP和Taq DNA聚合酶浓度等进行4因素5水平和4因素3水平两轮优化,建立了适合于建兰ISSR-PCR的反应体系:在20μL反应体系中,含引物0.25μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U和模板DNA 40 ng.在此基础上对扩增程序中的循环次数和退火温度,以及ISSR引物进行筛选.筛选获得的扩增程序为:94℃预变性5 min;接着进行32个循环:94℃变性35 s,52～56℃退火45 s,72℃延伸90 s;循环结束后,72℃延伸10 min.同时筛选得到14个扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙端		6	77	5.0	6.0
2	黄儒珠	福建师范大学生命科学学院	42	759	18.0	26.0
3	胡薇	福建师范大学生命科学学院	38	164	7.0	12.0