马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化

• 作者: 石晓蒙 蒙奕奕 谭飞燕 黄家华 黄寿先
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 马褂木 ISSR 扩增体系 优化
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1087-1091
• 页数: 5页
• 分类号: S792.21
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2013.7.1087

摘要

[目的]建立稳定的马褂木ISSR-PCR扩增体系,为马褂木种群ISSR多样性分析提供技术支持.[方法]采用单因素试验对ISSR-PCR扩增体系中的MgC12、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、DNA模板用量和退火温度等主要因素进行筛选优化.[结果]采用试剂盒方法提取马褂木叶片DNA的效果优于改良CTAB法,最优PCR反应体系为:总体积20.0 μL中含有l0x Buffer 2.0 μL、MgC12 1.8 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.5 μmol/L、Taq DNA聚合酶1.00 U、DNA模板60 ng、退火温度59.1℃.[结论]优化后的马褂木ISSR-PCR扩增体系能够扩增获得清晰、稳定的条带,可满足马褂木种群ISSR多样性分析的要求.