银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化

• 作者: 曹福亮 李广平 王国霞 花喆斌
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 林木育种学 银杏 ISSR-PCR 反应体系
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 页码范围: 186-190
• 页数: 5页
• 分类号: S718.46
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2008.02.011

摘要

为了对影响银杏Gingko biloba简单序列重复区间扩增一聚合酶链式反应(ISSR-PCR)扩增反应体系的因素进行优化,采用ISSR-PCR扩增技术和UVP凝胶电泳成像技术对模板DNA浓度、Taq酶用量、引物用量、dNTP的用量以及退火温度等因素进行筛选和优化.筛选优化后的反应条件:Taq酶0.3μg,2μL 10×Buffer(含15 mmol·L-1MgCl2),模板DNA 40 ng,dNTP 0.2 mmol·L-1,引物0.5 μmol·L-1,Mg2+1.5 mmol·L-1.PCR扩增程序:94℃变性5 min,然后进行38个循环:94℃变性30s,48～53℃(根据引物而定)退火30 s,72℃延伸1 min;最后72℃延伸10 min,4℃终止反应.上述反应条件可广泛应用于银杏的遗传多样性分析、遗传育种和转基因等方面的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹福亮	南京林业大学森林资源与环境学院	325	4983	37.0	55.0
2	李广平	南京林业大学森林资源与环境学院	15	120	6.0	10.0
3	王国霞	南京林业大学森林资源与环境学院	9	88	5.0	9.0
4	花喆斌	南京林业大学森林资源与环境学院	2	28	2.0	2.0