正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系

• 作者: 李景剑 符支宏 赵博 钟树华
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 大旗瓣凤仙 ISSR-PCR 反应体系 优化 正交设计
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 184-188
• 页数: 5页
• 分类号: S682.32|Q948
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2014.2.184

摘要

[目的]优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系,为大旗瓣凤仙遗传多样性分析提供技术参考.[方法]利用正交试验设计对大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA)4水平进行优化分析,并在此基础上对PCR反应过程中的退火温度进行筛选.[结果]建立了大旗瓣凤仙ISSR-PCR的优化反应体系,即在25.0 μL反应体系中含1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75～1.00 U、模板DNA 100 ng.通过该体系可以筛选出6条对大旗瓣凤仙种群扩增效果较好的引物.[结论]优化的ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性,可用于大旗瓣凤仙及凤仙属植物种群的ISSR遗传多样性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵博	中国科学院广西植物研究所	29	224	8.0	14.0
2	符支宏	中国科学院广西植物研究所	3	9	2.0	3.0
6	钟树华	中国科学院广西植物研究所	6	68	2.0	6.0
7	李景剑	中国科学院广西植物研究所	2	2	1.0	1.0