均匀设计优化喜盐鸢尾ISSR-PCR体系

• 作者: 杜欣 董玉芝 陈虹
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 喜盐鸢尾 均匀设计 ISSR-PCR
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 页码范围: 386-392
• 页数: 7页
• 分类号: S580.353
• 字数: 4039字
• 语种: 中文

摘要

以新疆野生喜盐鸢尾DNA为模板, 采用U20(54)和U12(34)均匀设计表,通过4因素5水平和4因素3水平两轮均匀优化试验,对影响ISSR-PCR扩增结果的一些因素如Mg2+ 、dNT P、引物以及TaqDNA聚合酶浓度以及循环数和退火温度等进行优化筛选, 建立了适合喜盐鸢尾的最佳ISSR-PCR反应体系:在25 μL反应体系中,包括2.5 μL 10×PCRBuffer ,2.0mmol/L M g2+,250 μmol/L dNTP,0.1 μmol/L 引物,0.5U TaqDNA 聚合酶,40 ng模板DNA.扩增程序为 :94℃预变性3 min;接着进行40个循环:94℃变性45 s,52.1℃退火30 s,72℃延伸1.5 m in;循环结束后,72℃延伸5 min,4℃保存.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈虹	新疆农业大学林学院	28	195	9.0	13.0
2	杜欣	新疆农业大学林学院	1	13	1.0	1.0