人单个中性粒细胞IL-8RβmRNA丰度的相对半定量研究

• 作者: 吴航宇 蔡春青 邹飞
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 白介素-8β型受体 单细胞RT-PCR 相对定量 中性粒细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 97-101
• 页数: 5页
• 分类号: Q3.46
• 字数: 4644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6834.2007.01.020

摘要

目的:探讨单个中性粒细胞中白介素-8β型受体(IL-8Rβ)mRNA的表达丰度.方法:采用倍比稀释相对定量单细胞RT-PCR方法分离纯化人外周血中性粒细胞并提取总RNA,针对IL-8RβmRNA设计引物,进行RT-PCR确认IL-8Rβ在中性粒细胞中的基因表达并优化反应条件.收集单个中性粒细胞胞内容物或完整细胞,以相同引物进行RT反应,再将后者所得的cDNA倍比稀释后,与前者共同经过两轮PCR扩增,并将最终产物以BamHI内切酶酶切鉴定产物的特异性.结果:IL-8RβmRNA在人中性粒细胞中有大量表达,单个中性粒细胞中亦能扩增出特异性的IL-8Rβ目的条带,并且将单个细胞内mRNA稀释104倍后仍可扩增出目的条带,BamHI内切酶酶切反应证实为目的产物.结论:人中性粒细胞表达IL-8RβmRNA,mRNA倍比稀释单细胞RT-PCR方法确认其丰度远高于一般mRNA含量,且此方法可在单细胞水平比较细胞内mRNA的丰度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹飞	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	110	556	13.0	18.0
2	蔡春青	南方医科大学公共卫生与热带医学学院	20	44	3.0	6.0
3	吴航宇		1	0	0.0	0.0