稳定表达基质细胞衍生因子1α的内皮细胞系构建及其与单核细胞的粘附作用

• 作者: 危当恒 吴孟津 唐朝克 姚峰 姜志胜 李国华 王佐
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 病理学与病理生理学 基质细胞衍生因子 粘附 单核细胞 细胞计数 人脐静脉内皮细胞
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 484-486
• 页数: 3页
• 分类号: R363
• 字数: 2034字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2007.07.002

摘要

目的 构建稳定表达基质细胞衍生因子1α的ECV304细胞系,研究基质细胞衍生因子1α在单核细胞/内皮细胞粘附中的作用.方法 将大鼠基质细胞衍生因子1α基因聚合酶链反应产物及质粒载体pcDNA3.1用EcoRⅠ进行酶切,去磷酸化,置于连接反应体系中进行连接,将连接产物氯化钙法转化DH5α菌.氨苄青霉素筛选并扩增阳性菌落,经酶切鉴定插入方向正确后,再用G418筛选、逆转录聚合酶链反应检测基质细胞衍生因子1α浓度,建立稳定转染ECV304细胞系.在6孔板上种植转染基质细胞衍生因子1α基因的ECV304细胞,加THP-1细胞37℃孵育30 min,磷酸缓冲液轻洗3遍,去除未粘附细胞,倒置显微镜下计数上、下、左、右、中5个视野,取其平均值得到每个视野粘附单核细胞数.结果 经逆转录聚合酶链反应检测证实,稳定表达基质细胞衍生因子1α的ECV304细胞系构建成功,细胞计数表明,转染ECV304细胞系粘附THP-1细胞数是转染空质粒的十几倍,CXCR4单抗基质细胞衍生因子1α多抗均显著减少其粘附力(P＜0.01).结论 内源性基质细胞衍生因子1α能促进ECV304细胞与单核细胞的粘附.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐朝克	南华大学心血管病研究所	95	749	15.0	22.0
2	姜志胜	南华大学心血管病研究所	107	532	11.0	18.0
3	姚峰	南华大学心血管病研究所	28	269	9.0	15.0
4	王佐	南华大学心血管病研究所	72	557	14.0	20.0
5	李国华	南华大学心血管病研究所	13	22	3.0	4.0
6	吴孟津	南华大学法医学教研室	15	110	6.0	10.0
7	危当恒	南华大学心血管病研究所	31	182	7.0	12.0