靶向SMPD1基因的RNA干扰对人成纤维细胞凋亡的保护作用

• 作者: 周灿权 张仁礼 马芸 高军
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: siRNA SMPD1 成纤维细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 159-164
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 5012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2007.02.009

摘要

[目的]以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,通过系统比较针对不同靶点的小干扰RNA(siRNA)对酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的沉默效果,筛选获得最有效的小干扰RNA序列,同时观察沉默SMPD1对细胞凋亡的保护作用.[方法]设计合成三对靶向SMPD1基因的小干扰RNA作为实验组,同时设立阴性对照组和脂质体组(lipofectamine 2000),瞬时转染原代培养的HFF细胞,采用荧光定量RT-PCR法及Western blot测定SMPD1表达抑制情况,并用化疗药物丝裂霉素诱导细胞凋亡,MTT法检测siRNA转染对细胞的保护作用.[结果]小干扰RNA1,2,3对SMPD1基因mRNA的抑制效率分别为96.3%,39%,63.2%,以siRNA1最高,最佳浓度为50 nmo1/L,最佳作用时间为48 h.SMPD1蛋白在48 h出现沉默效果,96 h开始恢复.50 nmol/L的siRNA1可以有效抑制化疗药物丝裂霉素引起的细胞凋亡,细胞存活率为73.8%,与对照组存活率65.4%比较差异具有统计学意义.[结论]三对siRNA均具有一定的靶基因沉默效果,其中siRNA1效果最佳,沉默效率达到96.3%;靶向SMPD1基因的siRNA能有效抑制人成纤维细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周灿权	中山大学附属第一医院生殖医学中心	167	876	16.0	21.0
2	马芸	中山大学中山医学院	25	106	6.0	9.0
3	高军	中山大学附属第一医院生殖医学中心	14	41	4.0	6.0
4	张仁礼	广东省人民医院妇产科生殖中心	6	13	2.0	3.0