毛白杨叶绿体基因启动子和终止子的克隆及其功能鉴定

• 作者: 尹维波 张发云 胡赞民
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 毛白杨 叶绿体基因 启动子 终止子 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 439-445
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 5039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.03.015

摘要

从毛白杨(Populus tomentosa)组培苗中提取基因组总DNA,用PCR方法克隆了包含psbA基因启动子、终止子和16S rRNA基因启动子的叶绿体DNA序列,并在此基础上克隆了启动子Prrn、PpsbA及终止子TpsbA.与烟草(Nicotiana tabacum)叶绿体基因组相关同源序列比较结果表明,这两种启动子中,起重要作用的调控序列元件,如-35区、-10区以及翻译调控序列等是高度保守的.利用叶绿体基因启动子的原核表达特性,用启动子Prrn(其后添加rbcL基因的RBS序列及突变的RBSm序列)和PpsbA及终止子TpsbA分别构建了GFP基因的原核表达载体pSGmT、pSmGmT和pPGmT,并以T7启动子为对照(载体pETGm),以大肠杆菌(Escherichia coli)BL21为宿主菌进行了初步的原核表达实验.检测结果表明,克隆到的叶绿体基因启动子PpsbA与Prrn具有生物学功能,其转录活性主要受大肠杆菌BL21本身的RNA聚合酶的调控,所控制的GFP是组成型表达的;T7RNA聚合酶对其有一定的作用,但比对T7启动子的作用弱.核糖体结合位点(RBS序列)的改变能够极大地影响目的基因的表达,说明RBS序列在基因表达翻译中有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡赞民	中国科学院遗传与发育生物学研究所	35	605	13.0	24.0
2	张发云	中国科学院植物研究所光合作用研究中心	7	66	3.0	7.0
11	尹维波	中国科学院遗传与发育生物学研究所	2	7	2.0	2.0