鸡传染性支气管炎病毒HN99株N基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性检测

• 作者: 崔保安 张淑霞 王建华 贺秀媛
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 N基因 免疫活性
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 32-36,40
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+9.6
• 字数: 4363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-9387.2007.04.008

摘要

鸡传染性支气管炎病毒HN99株核蛋白(N)基因PCR产物经BamH Ⅰ、HindⅢ双酶切,克隆人大肠杆菌原核表达载体pMAL-p2X,构建重组表达质粒pMAL-p2X-N,转化大肠杆菌TB1并进行诱导表达.通过pMALTM融合蛋白纯化系统对表达产物进行非变性纯化,将纯化的N蛋白按常规方法免疫新西兰大白兔,制备兔抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的多克隆抗体,并用ELISA法检测其生物活性.结果表明,表达的重组核蛋白纯化后出现2条带,相对分子质量分别约为92和82 ku,与Western blot出现的2条蛋白带一致;纯化的重组蛋白经裂解因子作用后,出现2条蛋白带,相对分子质量分别为45和35 ku,与预期结果相符合;制备的多克隆抗体可与不同鸡传染性支气管炎病毒株发生反应,与亲本毒株的反应性略高于与其他毒株的反应性.以上结果表明,原核表达的可溶性N蛋白具有高度的生物活性,有望作为新的基因工程抗原用于鸡传染性支气管炎病毒的群特异性诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王建华	西北农林科技大学动物科技学院	164	1674	22.0	30.0
2	崔保安	河南农业大学牧医工程学院	274	2313	25.0	33.0
3	张淑霞	西北农林科技大学动物科技学院	65	307	9.0	13.0
4	贺秀媛	河南农业大学牧医工程学院	44	115	6.0	8.0