两种方法转染EGFP基因对脐血造血干/祖细胞体外生长影响的比较

• 作者: 刘霆 孟文彤 智伟 黄晓兵
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 脐血CD34+细胞 阳离子聚合物转染 电穿孔转染 增强绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 889-891
• 页数: 3页
• 分类号: R651.1
• 字数: 3519字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2007.05.037

摘要

目的 探讨两种非病毒载体介导增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染方式对脐血干/祖细胞体外生长的影响.方法 免疫磁珠分选CD34+脐血干/祖细胞,平均分为3组,即未转染EGFP组、阳离子聚合物转染EGFP组和电穿孔转染EGFP组,将各组脐血CD34+细胞接种于人骨髓间充质干细胞(MSCs)构建的二维培养体系中在无外源性细胞因子情况下进行体外培养,7 d后进行集落形成单位(CFU)实验和高增殖潜能集落形成单位(HPP-CFU)实验.并利用荧光显微镜观察转染EGFP的CD34+细胞集落形成,Wright-Giemsa 染色了解其分化情况.结果 阳离子聚合物转染和电穿孔转染都可减少造血干/祖细胞集落形成的数目,且集落的大小也较未转染组小(P＜0.05).电穿孔转染组荧光集落形成的数目多于阳离子聚合物转染组,且所形成的荧光集落更大更亮(P＜0.05).两种转染方式的脐血造血干/祖细胞在体外培养后仍具有多向分化能力.结论 这两种非病毒载体介导EGFP基因转染方式均可造成脐血造血干/祖细胞生物学特性不同程度的损害.但电穿孔转染方式对于造血干/祖细胞体外生长损害较阳离子聚合物转染要小,且转染效率更高,转染基因表达更稳定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	智伟	四川大学华西医院干细胞与组织工程实验室	6	36	3.0	6.0