兔抗人细胞色素P450 1A2多克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘海英 吴春玲 唐晓波 徐东花 朱大岭 李郁梅 杨微 郭蕾
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CYP1A2 合成肽 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 448-451
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 4223字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备兔抗人细胞色素P450 1A2(CYP1A2)抗体及其特性鉴定.方法:利用生物信息学方法分析CYP1A2蛋白的序列,根据亲水性、抗原性、柔韧性及表面性等指标选择多肽序列,合成CYP1A2多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫日本大耳白兔制备抗CYP1A2抗体.辛酸-硫酸铵法纯化抗体,间接ELISA法测定抗体的效价及相对亲和力常数,Western blot鉴定其特异性,免疫组化进行定位.结果:获得针对小分子CYP1 A2的抗体.该抗体效价为1∶16 000;相对亲和力常数在105～106/M,具有实用价值;可与CYP1A2合成肽及天然CYP1A2出现特异性反应;可识别正常人肝脏组织CYP1A2;Western blot的结果显示,该抗体识别的相应抗原的相对分子质量为58 000.结论:合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗体.制备的兔抗CYP1A2合成肽抗体可应用于酶联免疫吸附试验、免疫印迹、免疫组化实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘海英	哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室	9	30	4.0	5.0
2	唐晓波	哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室	28	106	5.0	8.0
3	杨微	哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室	16	59	4.0	7.0
4	郭蕾	哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室	5	40	3.0	5.0
5	李郁梅	哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室	1	3	1.0	1.0
6	吴春玲	哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室	1	3	1.0	1.0