PCR测肝硬化腹水中细菌DNA的研究

• 作者: 袁春 连建奇 黄长形
• 来源期刊: 透析与人工器官
• 学科: 医学
• 关键词: 肝硬化 细菌移位 16S rRNA基因 聚合酶链反应 自发性细菌性腹膜炎
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R575.2|R446.5
• 字数: 3439字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨用PCR方法检测肝硬化患者腹水中细菌DNA的可行性,了解肝硬化患者发生细菌移位的高危因素.方法 在细菌16S rRNA基因保守区设计一对通用引物,对7种对照菌株、人基因组DNA、HBV-DNA、37份肝硬化患者腹水进行PCR扩增.腹水中细菌DNA阳性者纯化后经核苷酸测序鉴别细菌种类,同时收集患者临床资料,运用SPSS11.5软件对患者基本临床特征及主要检验结果进行统计分析.结果 7种对照菌株均得530 bpDNA片段,而与人基因组DNA、HBV-DNA无交叉阳性反应,敏感性试验可检测出1 Pg的细菌DNA.37份腹水中有9份获得530 bp DNA片段(24.3%),而腹水细菌培养阳性率为5.4%(2/37),二者比较有显著性差异(P＜0.05).腹水中细菌DNA阳性和阴性的两组肝硬化患者在上消化道出血的发生率、血清总胆红素水平、凝血酶原活动度、Child-Pugh积分、腹水总蛋白浓度、外周血白细胞总数等比较,有显著性差异(P＜0.05).结论 用通用引物通过PCR方法扩增细菌16S rRNA基因具有高度敏感性、特异性,可应用于肝硬化患者腹水中细菌DNA的检测及细菌移位的研究.肝功能损害、腹水调理活性低下和上消化道出血是肝硬化患者发生细菌移位的高危因素.