实时定量PCR测定人皮肤黑色素瘤细胞G6PD的表达

• 作者: 吕会茹 朱月春 李丹怡 杨银峰 童淑芬
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: A375细胞 G6PD Real-time PCR 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R733.72
• 字数: 2698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2007.04.004

摘要

目的 建立一种灵敏特异、重复性和稳定性好的检测G6PD表达的方法,以探究G6PD与肿瘤的相关性及其机理.方法 用Real-time PCR技术测定了野生型、siRNA干扰型和无关序列对照型人皮肤黑色素瘤A375细胞的G6PD基因表达.绘制出β-actin和G6PD的标准曲线,标定了方法的稳定性和重复性,并以内参照β-actin较对G6PD的量.结果 β-actin和G6PD标准曲线的回归系数分别为1.086和0.940;稳定性及重复性验证的Ctβ-actin值变异系数分别为2.46%和1.47%,而CtG6PD值变异系数分别为1.76%和1.87%.以野生型A375细胞作对照,无关序列不干扰A375细胞内源性G6PD基因表达(P＞0.05),针对G6PD基因表达的siRNA的干扰效率为49%(P＜0.01).结论 实时荧光定量PCR在检测细胞G6PD基因表达时具有高灵敏度、高重复性和高稳定性的特点,可进一步用于G6PD与肿瘤的相关性研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	童淑芬	昆明医学院生物化学教研室	10	69	5.0	8.0
2	杨银峰	昆明医学院生物化学教研室	8	65	3.0	8.0
3	朱月春	昆明医学院生物化学教研室	12	65	5.0	8.0
4	李丹怡	昆明医学院生物化学教研室	3	15	2.0	3.0
5	吕会茹	昆明医学院生物化学教研室	4	15	2.0	3.0