乙型肝炎病毒PreS1基因的原核表达及免疫学性质鉴定

• 作者: 唐霓 张君 慕生枝 陈维贤 黄爱龙 黄英
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 PreS1基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 5-8,12
• 页数: 5页
• 分类号: R512.8
• 字数: 3773字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2007.01.002

摘要

目的 构建含乙型肝炎病毒(HBV)PreS1基因的原核表达载体,获得高纯度、有生物活性的PreS1重组蛋白.方法 采用PCR法扩增PreS1及其N末端和C末端部分基因序列,克隆入原核表达载体pGST-MOLUC.重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测.用谷胱甘肽-Sepharose 4B凝胶亲和层析纯化的重组融合蛋白免疫新西兰家兔,制备GST-PreS1融合蛋白的抗血清.进一步用ELISA分析融合蛋白特异抑制HBV病毒与抗体结合的能力.结果 重组质粒转化宿主菌后成功诱导出Mr39 000、31 000和32 000的GST-PreS1、GST-PreS1N及GST-PreS1C融合蛋白,均与预期相对分子质量相符.Western blot检测获得特异的杂交条带.采用谷胱甘肽-Sepharose 4B凝胶纯化的融合蛋白纯度约为90%左右.融合蛋白免疫家兔后抗体滴度达到10-7.病毒捕获ELISA实验表明,融合蛋白能特异抑制病毒与家兔免疫血清结合.结论 GST-PreS1融合蛋白能够在大肠杆菌中高效表达,其纯化产物是研究PreS1基因在HBV感染过程中作用的有用工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄英	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学实验室	153	1434	20.0	29.0
2	黄爱龙	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学实验室	236	1190	16.0	23.0
3	张君	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学实验室	20	108	6.0	9.0
4	陈维贤	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学实验室	74	348	11.0	15.0
5	慕生枝	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学实验室	4	15	3.0	3.0