乙型肝炎病毒核心质粒的构建及原核表达

• 作者: 张振华 杨东亮 王蓉 田拥军 赵西平
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 关键词: 乙型肝炎病毒 核心蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 65-68
• 页数: 4页
• 字数: 2964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2005.02.001

摘要

目的构建乙型肝炎病毒核心区原核表达质粒并进行原核蛋白表达、纯化和鉴定.方法应用基因工程技术将编码截短型乙型肝炎病毒核心蛋白(HBcAg 1～144aa)的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内,在宿主菌B121(DE3)plysS内进行诱导表达,运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)及Western blot检测蛋白的灵敏度和特异性.结果成功地构建了含截短型乙型肝炎病毒核心区基因的质粒,并纯化得到了分子量约为19.5kD的目的蛋白.结论本方法所获得的重组截短型乙型肝炎病毒核心抗原(1～144a)纯度高,免疫反应性强.