乙型肝炎核心抗原基因的合成及其原核表达载体的构建

• 作者: 何涛 刘金波 段春燕 王丽 龚舒
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒核心抗原 基因合成 定点突变 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1242-1245
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2
• 字数: 2696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2009.06.040

摘要

目的:合成乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因并构建原核表达载体.方法:根据大肠杆菌偏嗜性密码子,利用Synthetic Gene Designer软件对HBcAg基因进行密码子优化,分成24条相互重叠的寡核苷酸片段,采用PCR法扩增获得完整的HBcAg基因,经BamH I和Xho I双酶切后定向克隆到pET30a(+),得pET30a(≠)-HB-cAg,经PCR扩增、酶切及测序鉴定后,定点突变法改正错误位点.之后将重组子转入BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况,Western Blot检测蛋白抗原性.结果:成功构建了重组质粒pET30a(≠)-HBcAg,SDS-PAGE分析显示目的蛋白主要以包涵体的形式在大肠杆菌表达,表达效率64%左右;Wesbern Blot显示表达产物具有较好的抗原性.结论:成功合成HBcAg基因并构建了原核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽	泸州医学院基础医学院医学分子生物学实验室	79	179	7.0	8.0
2	段春燕	泸州医学院基础医学院医学分子生物学实验室	36	137	6.0	10.0
3	何涛	泸州医学院基础医学院医学分子生物学实验室	112	491	13.0	18.0
4	龚舒	泸州医学院基础医学院医学分子生物学实验室	30	37	3.0	4.0
5	刘金波	郑州大学第一附属医院肛肠外科	10	92	5.0	9.0